3. Matériel nécessaire
Matériel fondamental pour la phase stérile
En fait il y a 4 choses qui sont réellement indispensables:
- Une empreinte de spores de l'espèce désirée
- Une marmite à vapeur (ou un four a micro-ondes).
- Une boîte à inoculation.
- De la propreté et de la méticulosité.
Je m'explique :
- Bien évidemment, les "graines" du champignons
sont nécessaire : pour vous en procurer, voire le chapitre
des adresses. Attention : Prenez garde de ne pas ouvrir l'empreinte ailleurs que dans la boîte à inoculation ... cf plus loin.
- Nous allons utiliser une marmite à vapeur (ou le four
a micro-onde, dans le cas de milieu de type boulette) pour la
stérilisation. Si vous en utilisez une qui n'a pas servi
depuis longtemps, assurez-vous qu'elle est en état de marche
(p.ex. la valve de sécurité fonctionne-t-elle?).
Plus elle est grande, mieux c'est. Vous trouverez bien quelqu'un
qui en a une.
- Cette boîte, dont je donne un exemple de plan plus loin,
nous permettra de travailler dans un milieu quasi stérile
et ainsi de ne pas perdre de temps à refaire mainte fois
des essais pour obtenir un milieu de culture libre de compétiteur.
Elle vous coûtera moins de 20.- Frs. et une à deux
heures de bricolage.
- Vous finirez par le comprendre, que le mot clé est
stérilité. Bien que la stérilité
à 100% n'existe pas, il faut mettre toutes les chances
de notre coté pour éviter une contamination par
des compétiteurs : il faudra désinfecter les instruments
à l'eau de Javel et à la flamme, vous laver les
mains, éviter de soulever de la poussière et ne
pas éternuer comme un fou au moment critique.
Si vous n'arrivez pas réunir ces quatre conditions: ABANDONNEZ.
Autre matériel nécessaire
Pour la préparation des spores et la culture sur agar
- Des bocaux a conserve en verre, d'une contenance de 2.5 dl.
- De l'eau distillée (ou genre distillée) qui
sera utilisée durant presque toute les étapes de
la culture
- Des boîtes de Pétri.
Achetez-en environ 40 pièces, ce qui reviendra à
moins de 10 Fr.
- Du agar-agar, 50 gr. Coût:
environ 5 Fr.
- Des croquettes pour chats, au boeuf p.ex., une petite boîte
: 3 Fr.
- Une boucle à innoculation
Pour le milieu de culture
- Si vous utiliser le milieu classique (seigle):
-
Des bocaux à conserve en verre aussi gros que possible
et qui puissent tenir avec leur couvercle mis en place et légèrement
vissé dans la marmite à vapeur. Contenance idéale:
1 litre. Si votre marmite ne peux contenir des bocaux aussi gros,
achetez-en des plus petits. Il en faut pour l'équivalent
de 4-5 litres. Coût: 15 Fr. Ci-contre, un exemple de bocal utilisé par les pros : il vous en faut un identique mais de 1 litre.
- 1.5-2 Kg de seigle complet. Si possible avec le label
bio, ce qui garantit l'absence de pesticide dont les champignons
ne raffolent pas.
- Si vous utilisez le milieu de type boulette:
- Des boîtes en plastique propres et facilement
nettoyage du genre Tupperware faisant au moins 15 cm de
profondeur. Plus elles sont longues et larges mieux c'est mais
il faut qu'ils puissent tenir dans le four a micro-ondes ainsi
que dans la boîte à inoculation.
Des bocaux peuvent aussi être utilisés.
- Des boulettes d'argile expansées de taille moyenne.
Ces boulettes sont utilisées en hydroculture et se trouvent
facilement dans n'importe quel grand magasin.
De la vermiculite peut aussi être utilisée.
- De la farine de riz brun complet.
Pour les diverses manipulations
- 5 dl d'eau de Javel.
- 2 sprays pour plante de bonne qualité : c.a.d.
le brouillard d'eau produit doit être le plus fin possible.
Coût: 10 Fr.
- Un réchaud à alcool et de l'alcool à
brûler (ou tout autre source de flamme propre).
- Une lame très affûtée qui peut être
stérilisée à la flamme : p.ex. : Lame de
rechange d'un cutter ou un scalpel à lame interchangeable
utilisé dans les art graphique (idéal mais 15
Fr.).
- Une seringue stérilisable de 10 ml et une aiguille
non pointue d'environ 5 cm de long (ou éventuellement
une seringue stérile jetable, il en faudra une neuve à
chaque nouvelle culture).